CAR-T，作为创新的肿瘤免疫疗法，以其高度特异性、持久疗效及低毒性等优势，为肿瘤治疗开辟了新路径。它不仅针对肿瘤细胞精准攻击，减少正常组织损伤，还为传统疗法无效的难治性肿瘤提供了有效选项。随着科研的不断深入和技术的日益成熟，CAR-T治疗前景广阔。在这一创新疗法中，非临床评价扮演着至关重要的角色，直接关系到CAR-T治疗的安全性和有效性。

为此，南宫NG·28云讲堂特别邀请了毒理研究部高级主任苑晓燕博士，为您深入解答关于CAR-T治疗非临床评价的常见疑问。

点击下方“http://www.hbyfcc.com/video/car-t-cell-therapy.shtml”，回顾南宫NG·28毒理研究部高级主任苑晓燕博士的整场直播！

Q1：复发扩增峰和GVHD怎么区分？

苑晓燕博士：复发扩增峰与GVHD反应T细胞扩增的不同方面。复发扩增峰通常是通过检测血液中的DNA拷贝数来判断，这是一个量化的指标，能够直接反映出特定DNA序列在血液中的数量变化。而GVHD是一种临床症状，主要表现为皮疹、腹泻、肝功能异常等，是供者T细胞被激活、增殖后对宿主器官或细胞产生攻击的结果。在某些CAR-T产品中可以看到复发扩增峰和GVHD会伴随出现。

Q2：双靶点CAR-T如何进行脱靶检测？

苑晓燕博士：脱靶检测的方法包括MPA、组织交叉反应（TCR）和体外细胞杀伤试验等。以MPA试验进行脱靶检测为例，要根据双CAR的结构策略来进行抗体的合成和开展MPA试验。总体原则是合成的、用于MPA检测的抗体结构要尽量反映T细胞表面表达的CAR的真实结构。例如，如果双CAR是串联在一起的，即它们形成了一个二价串联抗原识别结构，那么可以合成一个类似的二价串联抗体进行MPA检测，来评估CAR-T对不同抗原的特异性结合能力，从而判断其是否存在脱靶效应。如果双CAR是分开的，那么需要分别针对每个靶点，合成含有CAR结构的抗体，然后进行两个独立的MPA检测。

Q3：CAR-T的脱靶毒性是非临床关注的重点内容，其评价策略是什么？

苑晓燕博士：首先应采用多种体外方法（MPA、TCR、体外细胞杀伤）来评估CAR-T的脱靶毒性，考虑到各种方法的周期、便捷性和费用，同时又能及早的发现CAR-T的脱靶毒性，建议在CAR的早期筛选阶段先采用不同细胞株的体外杀伤检测，来确定候选CAR；针对筛选确定的候选CAR，建议在开展首次人体试验前进行MPA检测和人体冰冻组织交叉反应试验。

在新药研发的临床前研究阶段，如果您有任何不解之处，或者对某个专题有深入研究的兴趣，请提出您的问题和宝贵意见。南宫NG·28将全力支持，与您携手共进，在新药研发的道路上一起探索前行。